Диагностика вич-инфекции: симптомы и определение стадии

Диагностика вич-инфекции

Диагностика ВИЧ-инфекции: симптомы и определение стадии

ДиагностикаВИЧ-инфекции включает в себя два этапа:установление собственно факта зараженностиВИЧ-инфекцией и определение стадиизаболевания. За определением стадиинеразрывно следует и выяснение характератечения заболевания, а затем и формированиепрогноза у данного больного, а такжевыбор тактики лечения.

Какизвестно, диагностика любого инфекционногозаболевания основана на сопоставленииэпидемиологических, клинических илабораторных данных, и преувеличениезначения одной из групп этих данныхможет привести к диагностическимошибкам.

Эпидемиологическиекритерии ВИЧ-инфекции.

Первымэтапом диагностики ВИЧ-инфекции являетсясбор эпидемиологического анамнеза идругих эпидемиологических данных обобследуемом пациенте. Отсутствиеэпидемиологических данных можетсущественно затруднить диагностикуВИЧ-инфекции и препятствовать проведениюпротивоэпидемических мероприятий.

Эпидемиологическиекритерии иногда могут быть решающимив постановке диагноза ВИЧ-инфекции, номогут иметь и вспомогательное значение.

Критерием высокой вероятностиинфицирования является обнаружение уобследуемого лица таких факторов рисказаражения, как переливание донорскойкрови, полученной от ВИЧ-инфицированноголица, рождение обследуемой женщинойВИЧ-инфицированного ребенка.

Великавероятность инфицирования в случаерождения обследуемого от ВИЧ-инфицированнойматери, полового контакта с ВИЧ-инфицированнымлицом, совместного парентеральногоприема наркотиков с ВИЧ-инфицированнымлицом.

Определенный риск зараженияобнаруживается при достоверныхпарентеральных вмешательствах, которыеосуществляются инструментами, вероятно,контаминированными ВИЧ (то есть вовнутрибольничных и подобных им очагахВИЧ-инфекции с парентеральным путемпередачи ВИЧ).

Озаметном риске заражения речь можетидти в тех случаях, когда обследуемыйсообщает о половых связях или опарентеральном приеме наркотиков натерриториях, где ВИЧ значительнораспространен среди той группы населения,к которой принадлежит обследуемый.

Вто же время половые связи и приемнаркотиков на территориях с низкимраспространением ВИЧ-инфекции неисключает возможности заражения ВИЧ.

Отсутствиедостоверных факторов риска зараженияВИЧ может ставить под сомнение данныелабораторных исследований. В такихслучаях рекомендуется повторитьлабораторные исследования.

Клиническиекритерии ВИЧ-инфекции.

Ранняядиагностика ВИЧ-инфекции обеспечиваетсвоевременность терапии больного иразвертывание профилактическихмероприятий в очаге, предупреждающихнеумышленную передачу вируса отинфицированного здоровому человеку.

Наконец, ранняя диагностика позволяетсвоевременное проведение диспансеризации,психологической помощи, социальнойреабилитации.

Первые успехи в терапиибольных позволяют при ранней диагностикезначительно продлить жизнь больным идаже надеяться на излечение.

Сложностьранней диагностики, базирующейся наклинической картине заключается внеспецифичности, полиморфностисимптоматики в стадии II, уже не говоряоб отсутствии клиники в стадии I.

Тем неменее во всех случаях немотивированнойутомляемости, наличия ночных потов,головной боли, особенно на фонекратковременной лихорадки (3-10 дней) стемпературой 38-38,50 С, сопровождающейсятонзиллитом, длительного диарейногосиндрома, похудания за короткое время,необходимо в первую очередь исключитьВИЧ-инфекцию.

Постановке диагноза вэтот период помогает выявление приобъективном обследовании разнообразнойкожной сыпи (пятна, папулы, розеолы,гнойнички) или фурункулеза.

Наличиелимфаденопатии, даже в случаях увеличенияодной группы лимфатических узлов и темболее при генерализованной уже с большейдолей вероятности позволяет заподозритьклинически ВИЧ-инфекцию.

Для болезниособенно характерно увеличениезаднешейных, подчелюстных, над- иподключичных, подмышечных и локтевыхлимфатических узлов. Как правило, ониувеличиваются размером до 2-5 см вдиаметре, безболезненны, плотно-эластичнойконсистенции, изредка сливаются вконгломерат. Весьма характерно дляВИЧ-инфекции увеличение более чем одногоузла, более чем одной группы (за исключениемпаховых), длящееся свыше 3 мес.

Нередков ранней фазе болезни наличиепсихо-неврологической симптоматики:чувство тревоги, депрессия, шаткостьпоходки, снижение остроты зрения,судорожные припадки с признакамипоражения психо-эмоциональной сферы(нарушение памяти, забывчивость,неадекватность поведения, притуплениеэмоций). К наиболее характерным признакамраннейстадии ВИЧ-инфекции относятся:

1. Снижение массы тела менее, чем на 10%;

2. Изменения на коже и слизистых оболочек(себорйный дерматит, фолликулит, пруриго,псориаз, грибковые поражения ногтей,рецидивирующие язвы в полости рта,некротический гингивит);

3. Опоясывающий герпес у лиц моложе 50лет;

4. Рецидивирующие инфекции верхнихдыхательных путей;

Впромежуточнойстадииболезни, характеризующейся клиникойразвернутой суперинфекции, сформировавшейсяв результате иммунодефицита наиболеехарактерны:

1. Прогрессирующее снижение массы теласвыше 10%;

2. Диарея неясного генеза, продолжающаясясвыше 1 мес..;

3. Кандидоз полости рта;

4. Лейкоплакия;

5. Туберкулез легких;

6. Периферическая нейропатия;

7. Локализованные формы саркомы Капоши;

8. Диссеминирующий опоясывающий герпес;

9. Тяжелая, рецидивирующая бактериальнаяинфекция (пневмония, синуситы, пиомиозит).

Дляпозднейстадии,позволяющей диагностировать ВИЧ-инфекцию,или, во всяком случае, проводитьдифференциальную диагностику, относятся:

1. Пневмоцистная пневмония;

2. Токсоплазмоз;

3. Криптококкоз;

4. CMV-инфекция;

5. Простой герпес;

6. Прогрессирующая многоочаговаялейкоэнцефалопатия;

7. Гистоплазмоз;

8. Кандидозный эзофагит;

9. МАК-инфекция;

10.Сальмонеллезная септицемия;

11.Внелегочной туберкулез;

12.Лимфома, саркома Капоши;

13.Кахексия;

14.ВИЧ-энцефалопатия.

В1988 ВОЗ предложила в целях клиническойдиагностики проводить балловуюоценку симптомов,имеющихся у подозреваемого на ВИЧ-инфекциюбольного:

  • Персистирующая генерализованная лимфаденопатия 0
  • Изменения на коже и слизистых оболочках 1
  • Снижение массы тела 1
  • Выраженная утомляемость 1
  • Простой герпес 2
  • Диарея длительностью свыше 1 мес. 4
  • Лихорадка длительностью свыше 1 мес. 4
  • Снижение массы тела свыше 10% 4
  • Туберкулез легких 5
  • Рецидивирующая бактериальная инфекция 5
  • Лейкоплакия полости рта 5
  • Стоматит, молочница рта 5
  • Локализованная саркома Капоши 8
  • Кахексия 12

Приэтом сумма баллов от 0 до 3 оцениваетсякак вероятность ВИЧ-инфекции оченьмала, 4 -11 баллов — заболевание вероятно,а 12 и свыше — очень вероятно.

Вцелом клиническая диагностика ВИЧ-инфекции– это, прежде всего диагностика спектраСПИД-ассоциированной патологии убольного вторичным иммунодефицитом.Так как ВИЧ-индикаторные заболеваниявключают 23 нозологические формы, наиболеецелесообразен синдромальный подход кдиагностике.

Почти всегда имеет местоу больного синдром общей интоксикации(немотивированная слабость, вялость,быстрая утомляемость) развивающийсяна фоне длительного субфебрилитета илилихорадки неясного генеза, чаще в ночноеи утреннее время, сопровождающейсяобильным потом.

Постоянен синдромнемотивированной генерализованнойпериферической лимфаденопатии, в 20%сопровождающийся гепато- спленомегалиейразличной степени выраженности.

Одиниз ведущих синдромов болезни — синдромбронхо-легочной патологии, правдаглубокие поражения легочной ткани ввиде пневмоцистной пневмонии развиваютсяв далеко зашедших случаях болезни, иборазвивается пневмоцистоз на фонеглубокого иммунодефицита.

Затодлительностью свыше 1 месяца синдромнемотивированной диареи относится крано появляющимся, для него характернаустойчивость к медикаментозной терапии.Один из синдромов ВИЧ-инфекции -волнообразно текущая артралгия неяснойэтиологии.

К характернейшим проявлениямболезни следует отнести и синдромпоражений кожи и слизистых, проявляющийсянеспецифической макуло-папулезнойсыпью, устойчивой к терапии стероидамиэкземой, стафилококковым импетиго. Кдерматологическим проявлениям такжеотносятся рецидивирующие грибковые(микоз, кандидоз, бактериальные(фолликулиты, фурункулез, гидроаденит),вирусные (герпес) поражения кожи ислизистых оболочек. Наконец, ВИЧ-инфекциюхарактеризуют и новообразования, восновном в виде саркомы Капоши и лимфомы,а также некоторых других видов опухолей.

Наличиеу пациента не менее двух клинических идвух клинико-лабораторных (лейко- лифо-нейтропения, гипогаммаглобулинемия)из числа вышеперечисленных симптомовпозволяет с высокой степенью уверенностидиагностировать ВИЧ-инфекцию.

Но в тоже время в случае выявления двух изтаких весьма часто встречающихся убольных синдромов, как лихорадка илимфаденопатия, сохраняющихся напротяжении месяца и свыше, стойкаянемотивированная диарея, снижение массытела более чем на 10% или обильные ночныепоты дают основание на постановкудиагноза и тщательного лабораторногообследования.

Встадии2а заболеваниеможно заподозрить только по симптомуперсистирующей генерализованнойлимфаденопатии у больного из группыриска или при наличии эпиданамнеза.

Встадии2б(ранней или слабовыраженной) ещесохраняется соматическое благополучеие,нормальная активность. Поражения кожии слизистых оболочек нетяжелые,рецидивирующие инфекции респираторноготракта не носят генерализованногохарактера, потеря массы тела не превышает10%.

Припрогрессировании болезни, переходе встадию4Aпоявляются симптомы присоединившейсявторичной вирусно-бактеральной илигрибковой инфекции кожи и слизистых,хотя потеря массы тела не превышает10%, а патологической инфекционный процесспока поверхностный, локализован впределах кожи и слизистых оболочек ввиде опоясывающего герпеса, повторныхфарингитов, синуситов и т.п. В стадии4Бпотеря массы тела прогрессирует,появляется немотивированная диарея,длительная лихорадка, “волосатая”лейкоплакия языка, часто выявляетсятуберкулез легких (вообще он встречаетсяу больных ВИЧ-инфекцией в 40 %). Инфекционныеосложнения динамически развивающегосяу больных иммунодефицита уже болеестойкого и глубокого характера свовлечением внутренних органов, хотяеще и без дессиминации. Поражения жекожи и слизистых оболочек более упорноготечения, часто повторный илидиссеминированный опоясывающий герпес,уже в этой фазе развивается саркомаКапоши, пока локализованная. Стадия 4Bхарактеризуется генерализациейинфекционного процесса, помимо вирусных,бактериальных и грибковых пораженийпоявляются протозойные и паразитарныезаболевания, в частности пневмоцистнаяпневмония, атипичный микобактериоз,туберкулез с внелегочной локализацией,саркома Капоши принимает диссеминированныйхарактер. В этой фазе нередки пораженияцентральной нервной системы.

Согласнорекомендациям ВОЗ, надежная клиническаядиагностика ВИЧ-инфекции у взрослых идетей возможна при наличии одного из12 СПИД-индикаторных заболевания: 1)кандидоз пищевода, трахеи, бронхов,легких; 2) внелегочной криптококкоз; 3)криптоспоридиоз с диареей более одногомесяца; 4) цитомегаловирусное поражениекакого-либо органа (за исключением ипомимо печени, селезенки и лимфатическихузлов у больного старше 1 месяца); 5)инфекция, обусловленная вирусом простогогерпеса, персистирующая более 1 месяцау больного старше 1 месяца; 6) саркомаКапоши у больного моложе 60 лет; 7) лимфомаголовного мозга у больного моложе 60лет; 8) лимфоцитарная интерстициальнаяпневмония у ребенка до 13 лет, 9)диссеминированная инфекция, вызваннаябактериями группы Micobacterium avium intracellulareили M.Kansassii; 10) пневмоцистная пневмония;11) прогрессирующая многоочаговаялейкоэнцефалопатия; 12) токсоплазмозцентральной нервной системы у больныхстарше 1 месяца. Наличие одного из этихзаболеваний позволяет диагностироватьВИЧ-инфекцию при отсутствии серологическогоиммуноферментного исследования кровиили даже при получении серонегативногорезультата.

Неменее сложна дифференсация фаз болезни,т.е. разграничение стадий по клиническимкритериям.

По мнению специалистов CDC(США) наиболее объективный критерий -количество Т-хелперов, а не клиническиепроявления, ибо многие из этих состоянийчасто встречаются у лиц, не инфицированныхВИЧ.

В 1991 году Центр определил, чтопостановка диагноза СПИД может быть вслучаях, если: а) у инфицированногоимеется одно из 23 СПИД-ассоциированныхсостояний или б) он ВИЧ-инфицирован иимеет менее 200 СD4+ клеток/ мм.

Лабораторноекритерии ВИЧ-инфекции.

Обследованиюна ВИЧ-инфекцию в первую очередь подлежат:

1. Лица, у которых отмечается лихорадканеясного генеза, длительностью свыше1 мес., увеличение лимфатических узловдвух и более групп продолжительностьюсвыше 1 мес., диарея длительностью свыше1 мес.

, немотивированная потеря массытела свыше 10%, повторные пневмонии втечение одного года, рецидивирующиегнойно-бактериальные или паразитарныезаболевания, чсепсис, рецидивирующаяпиодермия, «волосатая» лейкоплакияязыка;

2. Лица с клиникой кандидозного эзофагита,кандидоза бронхов и легких, диссеминированногоили внелегочного кокцидиомикоза,пневмоцистной пневмонии, внелегочногокриптококкоза, криптоспоридиоза сдиареей юлительностью свыше 1 мес.

,цитомегаловирусного поражения внутреннихорганов кроме печени, селезенки,лимфатических узлов у больных старше6 мес., цитмегаловируснго ретинита спотерей зрения, герпетической инфекциис многоочаговыми язвами длительностьюсвыше 1 мес.

, бронхитом, пневмонией илиэзофагитом, рецидивирующего опоясывающегогерпеса, дессиминированного иливнелегочного гистоплазмоза, туберкулезалегких или внелегочного, изоспориозас диареей длительностью свыше 1 мес.

,распространенной или внелегочнойМАК-инфекции, прогрессирующей многофокуснойлейкоэнцефалопатии, токсоплазмозамозга, сальмонеллезной септицемии,саркомы Капоши, лимфомы, лимфоиднойинтерстициальной пневмонии (у детей)

Внастоящее время для лабораторнойдиагностики ВИЧ-инфекции используютсяразличные методы обнаружения ВИЧ,антигенов и генного материала ВИЧ, атакже методы обнаружения антител к ВИЧ.Все эти методы обладают различнойэффективностью, требуют различногооборудования и разного уровня подготовкиперсонала. Результаты этих исследованийтребуют грамотной интерпретации.

Источник: https://StudFiles.net/preview/1564532/page:3/

Этапы диагностики ВИЧ-инфекции (СПИДа)

В прошлый раз мы познакомились с антителами и антигенами (рекомендую перечитать, иначе будет сложно разобраться). Сегодня попробуем использовать эти знания для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции (вирус иммунодефицита человека).

Почему я написал именно «лабораторная диагностика»? Потому что СПИД можно диагностировать и по клиническим проявлениям, т. к. некоторые заболевания очень характерны для больных СПИДом и редко бывают у остальных.

Сюда относится саркома Капоши (опухоль), ряд грибковых поражений и т.д.

Саркома Капоши часто встречается при СПИДе.

Вы знаете, в чем отличия понятий ВИЧ-инфекции и СПИДа? СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита) — это более узкое понятие и означает последнюю стадию ВИЧ-инфекции, когда у человека возникают тяжелые рецидивирующие инфекционные заболевания, истощение, злокачественные опухоли, психиатрическая патология.

Все серологические (от лат. serum — сыворотка) методы обнаружения возбудителя в крови (да и не только в крови) основаны на реакции антиген-антитело. Только в одном случае используется известный антиген (то есть мы ищем антитела), а во втором — известное антитело (мы ищем антигены).

Логично предположить, что во втором случае этих антигенов в крови должно быть много.

Но в биологических жидкостях организма (кровь, спинномозговая жидкость) антигенов редко бывает много, потому что с микробами активно борется иммунная система, вырабатывая антитела.

Поэтому у нас остается главный вариант: искать антитела к микробу. В случае ВИЧ тоже ищут антитела к вирусу.

Отвлекусь от ВИЧ и задам каверзный вопрос: а почему тогда, например, гепатит B диагностируют не по наличию антител к возбудителю, а по наличию HBs-антигена этого вируса? А потому, что антитела к гепатиту B могут быть и у здоровых людей, когда они привиты, ведь против гепатита В есть прививка.

А вот вакцина против другого опасного гепатита — гепатита С — так и не создана. Поэтому в лабораториях ищут anti-HCV (антитела к вирусу гепатита С). HCV — это аббревиатура Hepatitis C Virus.

К слову, HBs-Ag называют еще австралийским антигеном, потому что впервые его обнаружили у автралийских аборигенов.

Итак, как диагностируют ВИЧ? Выявление ВИЧ-инфицированных происходит в 2 этапа: ИФА + иммуноблоттинг (отбор + подтверждение).

Первый этап — ИФА (иммуноферментный анализ): служит для отбора предположительно инфицированных лиц. Подробности метода описывать тут не стоит, скажу лишь, что антитела к ВИЧ выявляют с помощью других антител к искомым антителам (антитела против других антител). Эти «вспомогательные» антитела метят ферментом.

Метод ИФА является скрининговым (от англ. screen — тщательно отбирать; сортировать), то есть призван выявлять подозрительных лиц и отсеивать здоровых лиц. Все скрининговые тесты обязаны быть высокочувствительными, чтобы не пропустить больного.

Из-за этого их специфичность не очень высокая, то есть ИФА может дать положительный ответ («вероятно болен») у НЕинфицированных людей (например, у больных аутоиммунными заболеваниями: ревматизм, системная красная волчанка и др.).

Если у человека ИФА дало положительный результат, убиваться не надо, надо обследоваться дальше.

Второй этап — иммуноблоттинг (синоним: вестернблоттинг, от слова western — западный, blot — пятно). Иммуноблоттинг является более сложным методом и служит для подтверждения факта инфицирования.

Вирус разрушают на компоненты (антигены), которые состоят из ионизированных аминокислотных остатков, а потому все компоненты имеют отличающийся друг от друга заряд. С помощью электрофореза (электрического тока) антигены распределяются на поверхности полоски.

Если в исследуемой сыворотке есть антитела к ВИЧ, то они будут взаимодействовать со всеми группами антигенов, а это можно выявить.

Так может выглядеть результат иммуноблоттинга.Вы видите 10 полосок, вдоль которых распределились антигены ВИЧ.

p — это протеины (белки), gp — гликопротеины (белки с углеводами)

(если забыли, перечитайте строение антигенов).

Сейчас мы подошли к главному вопросу, на который я обещал ответить в прошлый раз. Можно ли заразиться при переливании проверенной донорской крови? Ответ: ДА. Взятую у донора кровь тщательно проверяют на наличие ряда инфекций: ВИЧ, сифилиса, гепатитов.

Кроме этого, донор заполняет анкету, где должен подтвердить, что в последние несколько месяцев или даже год (точную цифру не помню) у него не было случайных и опасных связей, он не наркоман, никогда не болел гепатитом, сифилисом и т.д.

Но проверяют кровь на наличие именно антител к ВИЧ, а для их образования должно пройти 2-3 месяца, иногда это период затягивается до 4-6 и даже 8 месяцев! По этой же причине после возможного заражения ВИЧ исследование крови при отрицательном результате необходимо повторять через 2 месяца.

Динамика образования антител к ВИЧ:как зависит количество антигенов (на примере p24) и антител к ВИЧ от времени.

Подробности в тексте.

В иммунологии период от инфицирования до появления значимого (которое можно выявить) количества антител называется «серологическим окном» (serum — сыворотка). То есть по анализам человек здоров, а в реальности — заражен. На рисунке выше вы видите, как изменяется концентрация антител и антигенов ВИЧ с течением времени. Рассмотрим это дело подробнее.

Сразу после инфицирования вирус начинает быстро размножаться (пик антигена p24). Иммунная система знакомится с вирусом (для этого нужно время) и начинает быстро его уничтожать. Появляются антитела, которые охотятся за вирусом и нейтрализуют его. Концентрация вируса в крови падает.

В прошлый раз мы говорили, что первыми образуются антитела класса M (IgM), а только потом класса G (IgG). Теперь вируса в крови мало, а антител много (тест ИФА стал положительным). Но годы идут, клетки иммунной системы гибнут. Антител становится меньше, а вируса больше.

В конце концов ВИЧ выходит из-под контроля иммунной системы (последний пик p24), наблюдается развернутая картина СПИДа, антител почти нет. Человек умирает от СПИДа.

Как вы уже догадались, «серологическое окно» на рисунке будет от момента заражения до появления IgM. Если кровь у инфицированного донора возьмут кровь в этом «серологическом окне», то по результатам ИФА он будет здоров.

Установлено, что ДНК ВИЧ может находиться в геноме человека как минимум три года без признаков активности и антитела к ВИЧ (по которым обнаруживают вирус) не появляются. Препараты крови такого донора очень опасны: вероятность заражения тут больше 90% при однократной манипуляции.

Правда, теперь цельную кровь не переливают, а переливают компоненты крови, а это немного безопаснее. Дело в том, что когда вирус находится только в ДНК лейкоцитов и не проявляет активности, его концентрация в сыворотке крови ничтожна.

Компоненты крови могут быть теоретически свободны от вируса.

Есть ли выход? Можно ли выявлять ВИЧ-инфицированных быстро — уже через 1-2 недели после заражения? Ответ: ДА. С помощью ПЦР — полимеразной цепной реакции. В аббревиатуре ПЦР часто переставляют слова, получая ЦПР. Это синонимы.

ПЦР была предложена в 1983 году. Вспомним, что такое вирус: это нуклеиновая кислота (ДНК или РНК) в белковой оболочке. С помощью ПЦР получают много копий нуклеиновой кислоты, которые потом выявляют с помощью меченых ферментов или изотопов, а также по характерному строению.

Исходную ДНК вируса нагревают до 95° на 30-40 сек, вследствие чего 2 цепочки ДНК раскручиваются, потом охлаждают и вносят фермент полимеразу, устойчивую к разным температурам. Фермент достраивает недостающие цепочки. Далее смесь снова нагревают, и т.д.

Проводят 30-80 циклов, число копий ДНК возрастает до миллиарда и более.

Это чрезвычайно чувствительный метод, теоретически можно выявить 1 ДНК на 10 мл среды. Но зато и стоимость его составляет около 100 долларов, если не ошибаюсь.

На эту цену еще влияет качество реактивов. Сами понимаете, одно дело французские или немецкие, а другое — российские или китайские.

Одним словом, с помощью ПЦР в массовом порядке кровь не будут проверять еще долго. ИФА намного дешевле.

Поэтому сейчас при переливании любых компонентов крови больной (или хотя бы родственник) должен написать расписку о том, что ему известны возможные последствия переливания препаратов крови.

Замечу, что если больной откажется от переливания, то ему придется написать расписку об отказе и возможных последствиях. Если же пациент без сознания, насколько я знаю, срочный вопрос о переливании крови (гемотрансфузии) решает консилиум врачей.

В любом случае, в истории болезни надо на пол-листа написать обоснование к данной процедуре.

Еще один каверзный вопрос: могут ли у больного СПИДом (не просто ВИЧ-инфицированного, а именно больного!) оба теста дать отрицательный результат (то есть показать, что антител к ВИЧ нету)? Ответ такой же: ДА.

В последней стадии СПИДа иммунная система настолько поражена, что концентрация антител к вирусу значительно снижается, и антитела могут не определяться. К тому же клеток, в которых может размножаться вирус, тоже остается крайне мало.

ВИЧ размножается в особой разновидности лимфоцитов, которые называются T-хелперами (T-помощниками) и принадлежат к лейкоцитам. T-хелперы еще называют CD4 (CD4+) клетками. CD означает рецептор, а число 4 — номер рецептора.

СD4+ клетки — это клетки, имеющие рецепторы CD4. А те клетки, которые данного рецептора не имеют, с полным правом могут называться CD4? клетки.

CD4+ клетки и ВИЧ.В этом рисунке вы сами сможете разобраться, т.к. всё уже обсуждалось.

Обозначения:

левая шкала — концентрация CD4 клеток в крови (млн/л)правая шкала — концентрация вируса в кровиснизу — время (недели и годы)

сверху — стадии: первичная инфекция, скрытый период, стадия СПИДа, смерть.

.

Текст получился сложный, хотя я и старался объяснить попроще. Как говорил наш зав. кафедрой физики на первом курсе, «мир устроен просто, но не примитивно».

???? Поэтому те, кто разобрался с антителами и антигенами ВИЧ, будут довольны, что получили новые знания по злободневной теме.

А те, кто не смог или не захотел разбираться, будут радоваться, что не учились в медвузе, где эти темы изучаются еще подробнее.

Дополнение от 15 марта 2008

Если переливать кровь донора, взятую в период «серологического окна», можно заразиться. Поэтому для снижения риска инфицирования цельную кровь сейчас не переливают, а делают из нее компоненты (эритроцитная, лейкоцитная, тромбоцитная масса, плазма) и препараты крови (альбумин, криопреципитат и др.).

Лейкоцитная и тромбоцитная масса имеют срок хранения, исчисляемый часами. Эритроцитная масса может храниться не более 21-35 дней в зависимости от консерванта.

Несмотря на месячный срок хранения, стараются переливать свежую эритроцитную массу, так как она легче переносятся реципиентом (при хранении в ней накапливаются продукты распада эритроцитов).

Препараты крови можно хранить длительно. Например, плазму крови можно хранить в замороженном виде до 2 лет. Поэтому сейчас всю плазму отправляют на 3-месячный карантин (хранение).

Спустя 3 месяца у донора повторно берут все анализы, и если антител не обнаружено, плазма считается безопасной, ее размораживают и переливают больному.

Такое карантинное хранение служит дополнительной защитой от инфицирования реципиента, хотя 100%-ной надежности добиться нельзя.

Зато в мировой практике придумано и длительно используется переливание аутологичных (собственных) компонентов крови. За некоторое время перед плановой операцией у пациента берут кровь, которую потом можно перелить ему во время операции. Таким образом, переливание собственных компонентов крови — единственный метод со 100% надежностью.

Источник: http://www.HappyDoctor.ru/info/46

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции

Своевременная диагностика ВИЧ-инфекции становится крайне важной мерой, т. к. ранее начало лечения может во многом предопределить дальнейшее развитие заболевания и продлить жизнь больного СПИДом.

В последние годы наблюдается весомый прогресс в области выявления этой страшной болезни: на смену старым тест-системам приходят более совершенные, методы обследования становятся более доступными, и их точность значительно повышается.

В данной статье расскажем о современных методах диагностики ВИЧ-инфекции, знать которые полезно для своевременного лечения данной проблемы и поддержания нормального качества жизни заболевшего.

Методики диагностики ВИЧ

В России для диагностики ВИЧ-инфекции проводится стандартная процедура, включающая в себя два уровня:

  • ИФА тест- система (скрининговый анализ);
  • иммунный блоттинг (ИБ).

Также для диагностики могут применяться другие методики:

Ифа тест-системы

На первом этапе диагностики для выявления ВИЧ-инфекции применяется скрининговый тест (ИФА), который основан на созданных в лабораториях белках ВИЧ, улавливающих вырабатывающиеся в организме в ответ на инфицирование специфические антитела. После их взаимодействия с реагентами (ферментами) тест-системы изменяется окраска индикатора. Далее эти изменения цвета обрабатываются на специальной аппаратуре, которая и определяет результат выполненного анализа.

Такие ИФА-тесты способны показывать результат уже через несколько недель после внедрения ВИЧ-инфекции. Этот анализ определяет не наличие вируса, а выявляет выработку антител к нему. Иногда, в организме человека выработка антител к ВИЧ начинается через 2 недели поле заражения, но у большинства людей они вырабатываются на более поздних сроках, спустя 3-6 недель.

Существует четыре поколения ИФА-тестов с различной чувствительностью. В последние годы чаще применяются тест-системы III и IV поколения, которые созданы на основе синтетических пептидов или рекомбинантных белков и обладают большей специфичностью и точностью.

Они могут использоваться для диагностики ВИЧ-инфекции, мониторинга распространенности ВИЧ и обеспечения безопасности при проверке донорской крови.

Точность ИФА-тест-систем III и IV поколения составляет 93-99% (более чувствительны тесты, которые выпускаются в странах западной Европы – 99%).

Для выполнения ИФА-теста проводится забор 5 мл крови из вены пациента. Между последним приемом пищи и анализом должно пройти не менее 8 часов (как правило, он выполняется утром натощак). Такой тест рекомендуется сдавать не ранее, чем через 3 недели после предполагаемого заражения (например, после незащищенного полового акта с новым половым партнером).

Результаты ИФА-теста получаются через 2-10 дней:

  • отрицательный результат: указывает на отсутствие инфицирования ВИЧ и не требует обращения к специалисту;
  • ложноотрицательный результат: может наблюдаться на ранних сроках инфицирования (до 3 недель), при поздних стадиях СПИДа при выраженном подавлении иммунитета и при неправильно проведенной подготовке крови;
  • ложноположительный результат: может наблюдаться при некоторых заболеваниях и при неправильно проведенной подготовке крови;
  • положительный результат: указывает на заражение ВИЧ инфекцией, требует проведения ИБ и обращения пациента к специалисту в центр СПИДа.

Почему ИФА-тест может давать ложноположительные результаты?

Ложноположительные результаты ИФА-теста на ВИЧ могут наблюдаться при неправильной обработке крови или у больных с такими состояниями и заболеваниями:

  • множественная миелома;
  • алкогольный гепатит;
  • инфекционные заболевания, спровоцированные вирусом Эпштейна-Барр;
  • состояние после диализа;
  • аутоиммунные заболевания;
  • на фоне беременности;
  • состояние после вакцинации.

При вышеописанных причинах в крови могут присутствовать неспецифические перекрестно реагирующие антитела, выработка которых была спровоцирована не ВИЧ-инфекцией.

В последние годы частота ложноположительных результатов существенно снизилась благодаря применению тест-систем III и IV поколения, которые содержат более чувствительные пептидные и рекомбинантные белки (они синтезируются при помощи генной инженерии in vitro). После начала применения таких ИФА-тестов частота ложноположительных результатов значительно снизилась и составляет около 0,02-0,5%.

Выявление ложноположительного результата не означает, что человек инфицирован ВИЧ. В таких случаях ВОЗ рекомендует провести еще один ИФА-тест (обязательно IV поколения).

Кровь пациента отправляется в референс или арбитражную лабораторию с пометкой «повторить» и исследуется на ИФА тест-системе IV поколения.

Если результат нового анализа отрицательный, то первый результат признается ошибочным (ложноположительным) и ИБ не проводится.

При положительном или сомнительном результате во время второго теста больному обязательно назначается проведение ИБ через 4-6 недель для подтверждения или опровержения ВИЧ-инфицирования.

Иммунный блоттинг

Окончательный диагноз инфицирования ВИЧ может устанавливаться только после получения положительного результата иммунного блоттинга (ИБ). Для его проведения применяется нитроцеллюлозная полоска, на которую нанесены вирусные белки.

Забор крови для ИБ выполняется из вены. Далее она подвергается специальной обработке и содержащиеся в ее сыворотке белки разделяют в специальном геле по их заряду и молекулярной массе (манипуляция проводится на специальной аппаратуре под воздействием электрического поля).

На гель из сыворотки крови накладывают нитроцеллюлозную полоску и проводят блоттинг («промакивание») в специальной камере. Полоска обрабатывается и если в используемых материалах есть антитела к ВИЧ, то они связываются с антигенными полосами на ИБ и проявляются в виде линий.

ИБ считается положительным если:

  • по критериям American CDC – на полоске есть две или три линии gp41, p24, gp120/gp160;
  • по критериям American FDA – на полоске есть две линии р24, р31 и линия gр41 или gр120/gр160.

В 99,9% случаев положительный результат ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование.

При отсутствии линий – ИБ является отрицательным.

При выявлении линий с gр160, gр120 и gр41- ИБ является сомнительным. Такой результат может выявляться при:

В таких случаях рекомендуется выполнение повторного исследования при помощи набора другой фирмы. Если же после дополнительного ИБ результат остается сомнительным, то необходимо наблюдение в течение полугода (через каждые 3 месяца проводятся ИБ).

Полимеразная цепная реакция

Тест на ПЦР может определять РНК вируса. Его чувствительность достаточно высока и он позволяет выявлять ВИЧ-инфицирование уже через 10 дней после заражения. В некоторых случаях ПЦР может давать ложноположительные результаты, т. к. его высокая чувствительность может реагировать и на антитела к другим инфекциям.

Данная методика диагностики является дорогостоящей, требует специального оборудования и высокой квалификации специалистов. Эти причины не дают возможности проводить ее при массовом тестировании населения.

ПЦР применяется в таких случаях:

  • для выявления ВИЧ у новорожденных, которые родились от ВИЧ-инфицированных матерей;
  • для выявления ВИЧ в «периоде окна» или при сомнительном ИБ;
  • для контроля концентрации ВИЧ в крови;
  • для исследования донорской крови.

Только по тесту ПЦР диагноз ВИЧ не ставится, а проводится в качестве дополнительного метода диагностики для разрешения спорных ситуаций.

Экспресс-методы

Одной из инноваций в диагностике ВИЧ стали экспресс-тесты, результаты которых могут оцениваться уже через 10-15 минут. Наиболее эффективные и точные результаты получаются при помощи иммунохроматографических тестах, основанных на принципе капиллярного потока.

Они представляют собой специальные полоски, на которые наносится кровь или другие исследуемые жидкости (слюна, моча). При наличии антител к ВИЧ спустя 10-15 минут на тесте появляются цветная и контрольная полоска – положительный результат.

При отрицательном результате – появляется только контрольная полоска.

Как и после тестов ИФА, результаты экспресс-тестов должны подтверждаться анализом ИБ. Только после этого может ставиться диагноз о ВИЧ-инфицировании.

Существуют экспресс-наборы для домашнего тестирования. Тест OraSure Technologies1 (США) одобрен FDA, продается без рецепта и может применяться для выявления ВИЧ. После проведения теста, в случае положительного результата, больному рекомендуется пройти обследование в специализированном центре для подтверждения диагноза.

Остальные тесты для домашнего использования еще не были одобрены FDA и их результат может быть очень сомнительным.

Несмотря на то, что экспресс-тесты по своей точности уступают ИФА-тестам IV поколения, они широко применяются для дополнительного тестирования населения.

Сдать анализы на выявление ВИЧ-инфекции можно в любой поликлинике, ЦРБ или в специализированных СПИД-центрах. На территории России они проводятся абсолютно конфиденциально, или анонимно.

Каждый пациент может рассчитывать на получение медицинской или психологической консультации до или после проведения анализа.

Платить за тесты на ВИЧ придется только в коммерческих лечебных учреждениях, а в государственных поликлиниках и больницах они выполняются бесплатно.

О том, какими путями можно заразиться ВИЧ-инфекцией и какие мифы существуют о возможностях заразиться, читайте в этой статье.

К какому врачу обратиться

Чтобы обследоваться на ВИЧ-инфекцию, нужно посетить терапевта и взять у него направление на анализ. Кроме того, можно прийти непосредственно в Центр профилактики и борьбы со СПИДом и сдать анализы там анонимно. Направляет на это обследование и врач-инфекционист или венеролог при подозрении на ВИЧ-инфекцию.

Посмотрите популярные статьи

Источник: https://myfamilydoctor.ru/sovremennye-metody-diagnostiki-vich-infekcii/

Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции

… диагностика любого инфекционного заболевания основана на сопоставлении эпидемиологических, клинических и лабораторных данных, и преувеличение значения одной из групп этих данных может привести к диагностическим ошибкам.

Клинические показания для обследования пациента на ВИЧ-инфекцию:

•лихорадка более 1 месяца;•диарея более 1 месяца;•необъяснимая потеря массы тела на 10% и более;•затяжные, рецидивирующие или не поддающиеся стандартной терапии пневмонии;•постоянный кашель более 1 месяца;•затяжные рецидивирующие вирусные, бактериальные, паразитарные болезни; •сепсис;•увеличение лимфоузлов двух и более групп свыше 1 месяца;•подострый энцефалит;•слабоумие у ранее здоровых людей; •наличие СПИД-индикаторных болезней.

Диагностика ВИЧ-инфекции включает в себя два этапа:

I этап — установление собственно факта зараженности ВИЧ-инфекцией;
II этап — определение стадии заболевания.

УСТАНОВЛЕНИЕ ФАКТА ЗАРАЖЕННОСТИ ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ

Установление собственно факта зараженности ВИЧ-инфекцией (то есть выявление ВИЧ-инфицированных) в свою очередь также включает в себя два этапа:

I этап иммуноферментный анализ (ИФА): метод ИФА является скрининговым (отборочным) — отбор предположительно инфицированных лиц, то есть его целью является выявление подозрительных лиц и отсеивние здоровых лиц; антитела к ВИЧ выявляют с помощью других антител к искомым антителам (антитела против других антител). Эти «вспомогательные» антитела метят ферментом. Все скрининговые тесты обязаны быть высокочувствительными, чтобы не пропустить больного. Из-за этого их специфичность не очень высокая, то есть ИФА может дать положительный ответ («вероятно болен») у неинфицированных людей (например, у больных аутоиммунными заболеваниями: ревматизм, системная красная волчанка и др.). Частота ложноположительных результатов при использовании различных тест-систем колеблется от 0,02 до 0,5%. Если у человека ИФА дало положительный результат, то для подтверждения факта инфицирования ВИЧ необходимо обследоваться дальше. При проведении ИФА в 3 — 5% случаев возможны ложноотрицательные результаты — если инфицирование произошло относительно недавно и уровень антител еще очень низкий, или в терминальной стадии болезни, характеризующейся тяжелым поражением иммунной системы с глубоким нарушением процесса антителообразования. Поэтому при наличии данных, свидетельствующих о контакте с инфицированными ВИЧ обычно проводят повторные исследования через 2 — 3 месяца.
II этапиммуноблоттинг (в модификации Western Blot, вестерн-блот): является более сложным методом и служит для подтверждения факта инфицирования. Этот метод выявляет не комплексные антитела к ВИЧ, а антитела к отдельным его структурным белкам (p24, gp120, gp41 и др.). Результаты иммуноблоттинга считаются положительными, если выявляются антитела хотя бы к трем белкам, один из которых кодируется генами env , другой — генами gag , третий — генами pol . Если обнаруживаются антитела к одному или двум белкам, результат считается сомнительным и требует подтверждения. В большинстве лабораторий диагноз ВИЧ-инфекции ставится, если одновременно выявляются антитела к белкам р24 , р31 , gp4l и gpl20/gp160. Суть метода: вирус разрушают на компоненты (антигены), которые состоят из ионизированных аминокислотных остатков, а потому все компоненты имеют отличающийся друг от друга заря; затем с помощью электрофореза (электрического тока) антигены распределяются на поверхности полоски — если в исследуемой сыворотке есть антитела к ВИЧ, то они будут взаимодействовать со всеми группами антигенов, а это можно выявить.

Следует помнить, что антитела к ВИЧ появляются у 90-95% инфицированных в течение 3-х месяцев после заражения, у 5-9% инфицированных антитела к ВИЧ появляются через 6 месяцев и у 0,5-1 % инфицированных антитела к ВИЧ появляются в более поздние сроки. В стадии СПИДа количество антител может снижаться, вплоть до полного исчезновения.

В иммунологии существует такое понятие, как «серологическое окно» — период от инфицирования до появления такого количества антител, которое можно выявить. Для ВИЧ этот период обычно продолжается от 2 до 12 недель, в редких случаях дольше.

В период «серологического окна» по анализам человек здоров, но на самом деле является зараженным ВИЧ.

Установлено, что ДНК ВИЧ может находиться в геноме человека не менее трех лет без признаков активности и антитела к ВИЧ (маркеры ВИЧ-инфицирования) не появляются.

В данный период («серологическое окно») выявить ВИЧ-инфицированного и даже через 1-2 недели после заражения возможно с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Это чрезвычайно чувствительный метод — теоретически можно выявить 1 ДНК на 10 мл среды.

Суть метода заключается в следующем: с помощью полимеразной цепной реакции получают много копий нуклеиновой кислоты (вирус является нуклеиновой кислотой -ДНК или РНК — в белковой оболочке), которые потом выявляют с помощью меченых ферментов или изотопов, а также по характерному строению.

ПЦР является дорогостоящим методом диагностики, поэтому при скрининге и в плановом порядке не используется.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТАДИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ

В основе развития СПИДа лежит, в первую очередь, разрушение Т-лимфоцитов-хелперов, маркируемых моноклональными антителами — кластерами дифференцировки – как CD4. В связи с этим проведение диагностики и наблюдение за прогрессированием заболевания невозможно без контроля субпопуляции Т-хелперов, который наиболее удобно осуществлять с помощью лазерного клеточного сортировщика.

При слабо выраженной ВИЧ-инфекции количество Т-лимфоцитов — чрезвычайно вариабельный показатель.

В целом, снижение числа клеток CD4 (абсолютное и относительное) обнаруживается у лиц, ВИЧ-инфицирование которых произошло не менее года назад.

С другой стороны, на ранних стадиях инфекции нередко оказывается резко повышенным число Т-супрессоры (CD8) как в периферической крови, так и в увеличенных лимфоузлах.

При выраженном СПИДе абсолютное большинство больных имеет сниженное общее число Т-лимфоцитов (менее 1000 в 1 мкл крови, в том числе лимфоцитов CD4 — менее чем 22 в 1 мкл, тогда как абсолютное значение содержания CD8 остаётся в пределах нормы). Соответственно, резко снижается соотношение CD4/ CD8. Ответ Т-лимфоцитов in vitro на стандартные антигены и митогены снижается в строгом соответствии с относительно сниженным числом CD4.

Для поздних стадии СПИДа характерны общая лимфопения, нейтропения, тромбоцитопения (соответственно, снижение числа лимфоцитов, нейтрофилов и тромбоцитов), анемия.

Эти изменения могут быть следствием центрального угнетения кроветворения за счёт поражения кроветворных органов вирусом, а также — аутоиммунного разрушения клеточных субпопуляции на периферии.

Кроме того, для СПИДа характерно умеренное увеличение количества гамма-глобулинов с доминирующим увеличением содержания IgG. Больные с выраженными симптомами СПИДа нередко имеют повышенный уровень IgA.

На некоторых стадиях заболевания существенно повышается уровень таких маркёров СПИДа, как 1-микроглобулин, кислотостабильный -интерферон, 1-тимозин. То же происходит с секрецией свободного неоптерина — метаболита макрофагов.

Пока не представляется возможным оценить относительную значимость каждого из перечисленных тестов, число которых постоянно возрастает. Поэтому их следует рассматривать во взаимодействии с маркёрами ВИЧ-инфекции как иммуновирусологического, так и цитологического характера. Для клинического анализа крови характерны лейкопения, лимфопения (соответственно, снижение числа лейкоцитов и лимфоцитов).

1 стадия — «стадия инкубации» — антитела к ВИЧ еще не выявляются; диагноз ВИЧ-инфекции на данной стадии ставится на основании эпидемиологических данных и лабораторно должен подтверждаться обнаружением в сыворотке крови пациента вируса иммунодефицита человека, его антигенов, нуклеиновых кислот ВИЧ;

2 стадия — «стадия первичных проявлений» — в данном периоде уже имеется выработка антител:;
2А стадия — «бессимптомная» — ВИЧ-инфекция проявляется только выработкой антител;
2Б стадия — «острая ВИЧ-инфекция без вторичных заболеваний» — в крови больных могут обнаруживаться широкоплазменные лимфоциты — «мононуклеары» и часто отмечается транзиторное снижение уровня СD4-лимфоцитов (острая клиническая инфекция отмечается у 50-90% инфицированных лиц в первые 3 месяца после заражения; начало периода острой инфекции, как правило, опережает сероконверсию, т.е. появление антител к ВИЧ);
2В стадия — «острая ВИЧ-инфекция с вторичными заболеваниями» — на фоне снижения уровня СD4-лимфоцитов и развившегося вследствие этого иммунодефицита появляются вторичные заболевания различной этиологии (ангина, бактериальная и пневмоцистная пневмония, кандидозы, герпетическия инфекция и др.);
3 стадия — «латентная» — в ответ на прогрессирование иммунодефицита происходит модификация иммунного ответа в виде избыточного воспроизводства СD4-клеток с последующим постепенным снижением уровня СD4-лимфоцитов, в среднем со скоростью 0,05-0,07×109/л в год; в крови обнаруживаются антитела к ВИЧ;
4 стадия — «стадия вторичных заболеваний» — истощение лимфоцитов популяции CD4, концентрация антител к вирусу значительно снижается (в зависимости от тяжести вторичных заболеваний выделяют стадии 4А, 4Б, 4В);
5 стадия — «терминальная стадия» — типично снижение количества СD4-клеток ниже 0,05×109/л; концентрация антител к вирусу значительно снижается или антитела могут не определяться.

Источник: http://doctorspb.ru/articles.php?article_id=981

Поделиться:
Нет комментариев

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.

×
Рекомендуем посмотреть